测试前应将所有的试剂恢复至室温（18～30℃）。
1. 从箔袋中为每个待测试样取出1个红色标记的混合微孔和5个用作标准对照液的红色微孔，将其放在微孔支架上。
2. 取同样数量的包被了抗体的微孔。把暂不使用的孔放回到箔包中，并重新密封，以保护抗体。在带子的一端标上“1”，然后放到孔架上，将有标记的一端放在左边。
3. 摇晃试剂滴瓶使每种试剂混合，以备使用。
4. 每次使用新吸咀，吸取150μl标准对照液和样品测试液按下列顺序加到红色标记的混合孔内，一次*多只做两个12孔的条。
0 2.5 5 15 50 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7
S8 S9 S10 S11 S12 S13 S14 S15 S16 S17 S18 S19
5. 给12道移液器装上吸咀，从混合微孔中吸取100μl标准对照液和样品测试液到包被了抗体的微孔中，将微孔支架在平面上前后滑动混合20秒钟。
6. 于室温下（18—30℃）温育10分钟。弃去红色标记的转移微孔。
7. 抖出各微孔中的溶液到水槽中。用装满洗涤缓冲液的洗涤瓶，将每个微孔灌满，再摇动倒出。重复5次。将微孔倒转，排除剩余的洗涤缓冲液，使劲抖出微孔中液体，让它流在吸水巾上。
8. 从兰色试剂瓶中倒出所需量的试剂到兰色试剂槽中。
9. 用12道移液器和新吸咀吸取100μl酶标记结合物到每个微孔中。将微孔支架在平面上前后滑动混合20秒钟。
10. 在室温（18—30℃）下温育10分钟。
11. 同第7步一样洗涤微孔。
12. 从绿色试剂瓶中倒出所需量的试剂到绿色试剂槽中。
13. 给12道移液器装上吸咀，吸取100μl底物溶液到每个微孔中，将微孔支架在平面上前后滑动混合20秒钟。不要弃去吸咀。
14. 在室温下温育（18—30℃）10分钟。
15. 从红色试剂瓶中倒出所需量的试剂到红色试剂槽中。
16. 用吸过底物溶液的移液器和吸咀，吸取100μl红色终止液到每个微孔中，将微孔支架在平面上前后滑动混合20秒钟。
17. 弃去微孔的底座，将其置于带650滤光片的微孔读数器中可读数。
18. 用专用微孔读数器，可直接得出测试结果。